पिपेट प्रयोगशाला के उपकरण हैं जिनका उपयोग बहुत कम मात्रा में तरल पदार्थ को मापने और स्थानांतरित करने के लिए किया जाता है। पिपेट माप में शुद्धता बहुत महत्वपूर्ण है क्योंकि पिपेट द्वारा गिराए गए मात्रा में अंतर प्रयोगात्मक परिणामों को प्रभावित कर सकता है। सटीकता सुनिश्चित करने के लिए, हर कुछ महीनों में पिपेट अंशांकन की जांच करना महत्वपूर्ण है। अंशांकन प्रक्रिया यह जांचने के लिए उपयोगी है कि क्या यह उपकरण सही मात्रा में तरल टपक रहा है, ताकि जरूरत पड़ने पर मरम्मत की जा सके।
कदम
2 का भाग 1: कैलिब्रेशन की जाँच करना
चरण 1. आवश्यक सामग्री इकट्ठा करें।
पिपेट के अंशांकन की जांच करने के लिए, एक पिपेट, पिपेट टिप्स, आसुत जल, बीकर, थर्मामीटर, संतुलन और वजन कप की आवश्यकता होती है। 1 एल के अधिकतम मान के साथ माइक्रोपिपेट को कैलिब्रेट करने के लिए उपयोग की गई शेष राशि माइक्रोग्राम स्केल में होनी चाहिए।
- आपको 5 एमएल से अधिक पानी की आवश्यकता नहीं होगी। बीकर में पानी भरें।
- सुनिश्चित करें कि पिपेट टिप सही है और पिपेट में आराम से फिट बैठता है।
चरण 2. आसुत जल का तापमान मापें।
थर्मामीटर को पानी में डालें और इसे कम से कम एक मिनट तक बैठने दें। यदि थर्मामीटर की लाल रेखा अभी भी गतिमान है, तो एक मिनट और प्रतीक्षा करें। एक मिनट के बाद, तापमान रिकॉर्ड करें। जब आपका काम हो जाए तो थर्मामीटर लें और उसे सुखा लें।
पानी का तापमान जानना महत्वपूर्ण है, क्योंकि इसका उपयोग अंशांकन की जांच के लिए की गई गणना के लिए किया जाएगा।
चरण ३. तोलने वाले कप को तुला पर रखें और तुला को शून्य कर दें।
आदर्श रूप से, उपयोग की गई शेष राशि में एक दरवाजा और एक अछूता स्थान होता है। तोलने वाले कप को बैलेंस चेंबर में रखें और दरवाज़ा बंद कर दें। अगर आपके बैलेंस में एक क्यूबिकल और एक दरवाजा नहीं है, तो बस बैलेंस पर एक वजन का प्याला रखें। "शून्य" या "तारे" बटन दबाएं और पैमाने के शून्य दिखाने की प्रतीक्षा करें।
पैमाने को शून्य करने से प्लास्टिक के कप का वजन कम हो जाता है और आप केवल कप में रखे पदार्थ के वजन को ही तौल सकते हैं।
चरण 4. अंशांकन के लिए पिपेट तैयार करें ।
शुरू करने से पहले पिपेट को इथेनॉल से पोंछ लें और सुनिश्चित करें कि कुछ भी पिपेट की नोक को बंद नहीं कर रहा है। पिपेट टिप के लिए सही पिपेट टिप संलग्न करें और परीक्षण की जाने वाली मात्रा निर्धारित करें।
अंशांकन के लिए, सबसे छोटे और सबसे बड़े संस्करणों का परीक्षण करें जिन्हें पिपेट से हटाया जा सकता है।
चरण 5. पिपेट टिप को कैलिब्रेट करने से पहले धो लें।
बटन को पहली सीमा तक दबाएं और पिपेट की नोक को आसुत जल में लगभग 2 मिमी की गहराई तक डुबोएं। कुछ तरल को अवशोषित करने के लिए बटन को छोड़ दें और फिर बटन दबाकर तरल को फिर से छोड़ दें। उपयोग करने से पहले ड्रॉपर युक्तियों को धोने के लिए इस चरण को तीन बार दोहराएं।
पिपेट टिप पर शेष तरल निकालने के लिए बटन को दूसरी सीमा तक दबाएं, फिर पिपेट को पानी से बाहर निकालें।
चरण 6. अंशांकन मात्रा को चूसो।
आसुत जल के बाहर स्थित पिपेट टिप के साथ, बटन को पहली सीमा तक दबाएं। पिपेट टिप को 2 मिमी गहरे आसुत जल में डुबोएं और पिपेट टिप में तरल चूसने के लिए बटन को छोड़ दें। ड्रॉपर टिप को पानी से निकालने से पहले लगभग 1 सेकंड प्रतीक्षा करें।
सुनिश्चित करें कि आकांक्षा प्रक्रिया के दौरान पिपेट टिप पूरी तरह से जलमग्न है। ड्रॉपर टिप में बुलबुले नहीं होने चाहिए या परिणाम गलत हो सकता है।
चरण ७. तुला पर द्रव्य को तोलने वाले बर्तन में डालें।
पिपेट टिप को तोलने वाले कप के नीचे रखें और फिर पिपेट बटन को पहली सीमा तक दबाएं। पानी से थोड़ा दूर दूसरे बिंदु पर जाएं, फिर बटन को दूसरी सीमा तक दबाएं। बटन को दबाए रखते हुए पिपेट टिप को तोलने वाले कप से उठा लें।
टिप को पिपेट से संलग्न रखें क्योंकि आप इसे कुछ अन्य अंशांकन परीक्षणों के लिए फिर से उपयोग करेंगे।
चरण 8. तुला पर दर्शाए गए भार को रिकॉर्ड करें।
यदि आप डोर बैलेंस का उपयोग कर रहे हैं तो बैलेंस बूथ का दरवाजा बंद कर दें। तब तक प्रतीक्षा करें जब तक कि संख्याएँ और न बदलें। अपनी कॉपी मैं लिखो।
तब तक प्रतीक्षा करना महत्वपूर्ण है जब तक कि पैमाने पर संख्याएँ लिखने से पहले फिर से न बदलें। यदि आप प्रतीक्षा नहीं करते हैं तो नोट गलत हो जाएंगे।
चरण 9. कम से कम 10 बार रीडिंग करने के लिए इस प्रक्रिया को दोहराएं।
पैमाने को फिर से शून्य करें, उपयोग करने से पहले पिपेट युक्तियों को धो लें, समान मात्रा में तरल चूसें, वॉल्यूम निकालें, फिर वजन रिकॉर्ड करें। समान मात्रा में आसुत जल का भार रिकॉर्ड करें, फिर अपने सभी नोटों को औसत करें।
यदि प्रत्येक वॉल्यूम का कई बार परीक्षण किया जाता है, तो आप इस प्रक्रिया को अलग-अलग वॉल्यूम के लिए दोहरा सकते हैं।
2 का भाग 2: अंशांकन परिणाम की गणना करना
चरण 1. परिकलित आयतन के लिए सूत्र को परिभाषित करें।
पिपेट द्वारा निकाले गए तरल की मात्रा की गणना करने का सूत्र V = w * Z है, w पानी का वजन है, Z पानी के घनत्व के आधार पर रूपांतरण कारक है, जबकि V पानी की मात्रा का आयतन है निकाला गया।
- प्रयोग की शुरुआत में दर्ज तापमान का उपयोग करके पानी के घनत्व की गणना करके चर Z प्राप्त किया जा सकता है।
- उदाहरण के लिए: यदि पानी का तापमान 23°C है, तो Z का मान 1.0035 g/mg है।
चरण 2. पिपेट अंशांकन के समग्र औसत की गणना करें।
पिपेट द्वारा छोड़े गए पानी की मात्रा का वजन कम से कम दस गुना किया गया है। इन सभी मानों को औसत करने के लिए, उन सभी को एक साथ जोड़ें और 10 से विभाजित करें। यदि आपने कम या ज्यादा प्रक्रिया की है, तो समग्र परिणाम जोड़ें और फिर किए गए परीक्षणों की संख्या से विभाजित करें।
- उदाहरण के लिए: 10μL पिपेट के साथ आपके द्वारा किए गए 10 प्रयोगों के पानी का वजन इस प्रकार है: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99, और 9, 98।
- माध्य है: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, ८४ /10 = ९,९८४
चरण 3. चरों को समीकरण में डालें और हल करें।
एक बार जब आप प्रत्येक चर के लिए सही संख्या निर्धारित कर लेते हैं, तो उसे सूत्र में प्लग करें और गणना की गई मात्रा को पूरा करें। इस समीकरण को हल करने के लिए, बस सभी परीक्षणों के औसत वजन को Z मान से गुणा करें।
उदाहरण के लिए: वी = डब्ल्यू * जेड = 9,984 * 1.0035 = 10, 019
चरण 4. पिपेट की सटीकता की गणना करें।
समीकरण A = १०० x V. का प्रयोग करेंऔसत/वी0 पिपेट सटीकता की गणना करने के लिए। ए पिपेट सटीकता को इंगित करता है, वीऔसत परिकलित माध्य आयतन है, और V0 पिपेट पर निर्धारित मूल्य है। सटीकता मान 99-101% के बीच होना चाहिए।
- यदि पिपेट को ठीक से कैलिब्रेट किया गया है, तो परिकलित मान पिपेट पर निर्धारित वास्तविक मान के बहुत करीब होना चाहिए।
- उदाहरण के लिए: ए = १०० x वीऔसत/वी0 = १०० x १०, ०१९/१० = १०० x १.००१९ = १००.१९%
- यह पिपेट ठीक से कैलिब्रेटेड है।
चरण 5. यदि आवश्यक हो, तो अंशांकन के लिए पिपेट भेजें।
यदि आपका पिपेट अंशांकन परीक्षण पास नहीं करता है, तो अभी प्रयोग के लिए इसका उपयोग न करें। पिपेट बहुत नाजुक और महंगे प्रयोगशाला उपकरण हैं। आप कैलिब्रेशन को स्वयं ठीक नहीं कर सकते, पिपेट को मरम्मत के लिए भेजा जाना है। वैकल्पिक रूप से, कई कंपनियां आपकी प्रयोगशाला में आएंगी और साइट पर पिपेट को कैलिब्रेट करेंगी।
