रसायन विज्ञान में, तनुकरण किसी घोल में किसी पदार्थ की सांद्रता को कम करने की प्रक्रिया है। चेन कमजोर पड़ना कमजोर पड़ने वाले कारक को तेजी से बढ़ाने के लिए एक समाधान का बार-बार कमजोर पड़ना है। यह प्रक्रिया आमतौर पर उन प्रयोगों में की जाती है जिनमें उच्च सटीकता के साथ बहुत पतला समाधान की आवश्यकता होती है। उदाहरण के लिए, लघुगणकीय पैमाने पर सांद्रता वक्रों वाले प्रयोग या जीवाणुओं के घनत्व को निर्धारित करने के लिए प्रयोग। जैव रसायन, सूक्ष्म जीव विज्ञान, औषध विज्ञान और भौतिकी जैसे वैज्ञानिक प्रयोगों में श्रृंखला कमजोर पड़ने का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।
कदम
विधि 1 में से 2: बुनियादी कमजोर पड़ने का प्रदर्शन
चरण 1. उपयुक्त तनु विलयन ज्ञात कीजिए।
तनुकरण के लिए उपयोग किए जाने वाले द्रव का निर्धारण करना बहुत महत्वपूर्ण है। कई घोल आसुत जल में घुलनशील होते हैं, लेकिन हमेशा ऐसा नहीं होता है। यदि आप बैक्टीरिया या अन्य कोशिकाओं को पतला कर रहे हैं, तो इसे एक संस्कृति माध्यम पर करें। आपके द्वारा चुना गया तरल सभी श्रृंखला कमजोर पड़ने के लिए उपयोग किया जाएगा।
यदि संदेह है कि किस मंदक का उपयोग करना है, तो मदद लें या ऑनलाइन देखें। अन्य लोगों के उदाहरण देखें जिन्होंने समान श्रृंखला कमजोर पड़ने की प्रक्रिया की है।
चरण 2. ९ मिलीलीटर तनु युक्त कई परखनलियां तैयार करें ।
टेस्ट ट्यूब का उपयोग खाली तनुकरण के लिए किया जाता है। सबसे पहले, पहले ट्यूब में undiluted नमूना डाल दिया, फिर अगले ट्यूबों के उत्तराधिकार में कमजोर पड़ने पर करें।
- तनुकरण शुरू करने से पहले उपयोग की गई सभी ट्यूबों को लेबल करें ताकि प्रयोग चलने के बाद आप भ्रमित न हों।
- प्रत्येक ट्यूब 10 तनुकरणों से भरी जाएगी, जो उस नली से शुरू होगी जिसका पदार्थ तनुकृत नहीं किया गया है। पहली ट्यूब में पतलापन 1:10 है, उसके बाद दूसरी ट्यूब में 1:100, तीसरी के लिए 1:1000, और इसी तरह। पहले से किए जाने वाले कमजोर पड़ने की मात्रा निर्धारित करें, ताकि आप पतला समाधान बर्बाद न करें।
चरण 3. एक परखनली तैयार करें जिसमें कम से कम 2 एमएल बिना पतला घोल हो।
इस श्रृंखला को कमजोर करने के लिए आवश्यक घोल की न्यूनतम मात्रा 1 एमएल है। यदि आप केवल 1 एमएल का उपयोग करते हैं, तो कोई भी बिना पतला घोल शेष नहीं रहेगा। undiluted समाधान के लिए लेबल बीएलएम।
किसी भी तनुकरण को शुरू करने से पहले घोल को अच्छी तरह मिला लें।
चरण 4. पहला कमजोर पड़ने का प्रदर्शन करें।
बीएलएम टेस्ट ट्यूब से एक पिपेट के साथ बिना पतला घोल का 1 एमएल लें और इसे 1:10 लेबल वाली टेस्ट ट्यूब में डालें जिसमें 9 एमएल डाइल्यूंट हो, फिर अच्छी तरह मिलाएं। मंदक के 9 mL में अब 1 mL undiluted समाधान है। इस प्रकार, समाधान को 10 के कमजोर पड़ने वाले कारक से पतला कर दिया गया है।
चरण 5. दूसरा कमजोर पड़ने का प्रदर्शन करें।
दूसरी तनुकरण के लिए, 1:10 ट्यूब से घोल का 1 mL लें, फिर इसे 1:100 ट्यूब में डालें, जिसमें 9 mL मंदक भी है। सुनिश्चित करें कि अगली ट्यूब में डालने से पहले 1:10 ट्यूब में घोल पूरी तरह से मिल गया है। फिर से, सुनिश्चित करें कि 1:100 ट्यूब में पतलापन पूरी तरह से मिश्रित है। 1:10 ट्यूब से समाधान 1:100 ट्यूब में 10 गुना पतला था।
चरण 6. लंबी श्रृंखला कमजोर पड़ने के लिए इस प्रक्रिया को जारी रखें।
वांछित समाधान एकाग्रता प्राप्त करने के लिए इस प्रक्रिया को जितनी बार आवश्यक हो उतनी बार दोहराया जा सकता है। एकाग्रता वक्रों का उपयोग करने वाले प्रयोगों में, आप 1, 1:10, 1:100, 1:1,000 के तनुकरण के साथ कई समाधान तैयार करने के लिए श्रृंखला कमजोर पड़ने का प्रदर्शन कर सकते हैं।
विधि २ का २: कमजोर पड़ने वाले कारक और अंतिम एकाग्रता की गणना करना
चरण 1. श्रृंखला कमजोर पड़ने में अंतिम कमजोर पड़ने के अनुपात की गणना करें।
प्रत्येक चरण से अंतिम चरण तक कमजोर पड़ने वाले कारक को गुणा करके कुल कमजोर पड़ने का अनुपात निर्धारित किया जा सकता है। गणितीय चित्रण सूत्र D. के साथ हैटी = डी1 एक्स डी2 एक्स डी3 एक्स … एक्स डी , डीटी कुल तनुकरण कारक है और D मंदक अनुपात है।
- उदाहरण के लिए, मान लें कि आप 4 बार 1:10 का पतलापन करते हैं। मंदक कारक को सूत्र में प्लग करें: Dटी = १० x १० x १० x १० = १०,०००
- इस श्रृंखला कमजोर पड़ने में चौथी ट्यूब में पतला कारक 1:10,000 है। तनुकरण के बाद पदार्थ की सांद्रता तनुकरण से पहले की तुलना में 10,000 गुना कम है।
चरण 2. तनुकरण के बाद विलयन की सांद्रता ज्ञात कीजिए।
श्रृंखला तनुकरण के बाद किसी विलयन की अंतिम सांद्रता ज्ञात करने के लिए, आपको इसकी प्रारंभिक सांद्रता का पता होना चाहिए। सूत्र C. हैसमाप्त = सीशुरुआत/डी, सीसमाप्त पतला घोल की अंतिम सांद्रता है, Cशुरुआत मूल समाधान की प्रारंभिक एकाग्रता है, और डी पूर्व निर्धारित कमजोर पड़ने का अनुपात है।
- उदाहरण के लिए: यदि आप एक सेल समाधान से शुरू करते हैं, जिसकी एकाग्रता 1,000,000 कोशिकाओं प्रति एमएल है और कमजोर पड़ने का अनुपात 1,000 है, तो पतला नमूने की अंतिम एकाग्रता क्या है?
-
सूत्र का उपयोग करके:
- सीसमाप्त = सीशुरुआत/डी
- सीसमाप्त = 1.000.000/1.000
- सीसमाप्त = १००० कोशिकाओं प्रति मिलीलीटर ।
चरण 3. सुनिश्चित करें कि सभी इकाइयाँ समान हैं।
कोई भी गणना करते समय, सुनिश्चित करें कि गणना के अंत में इकाइयाँ हमेशा समान हों। यदि प्रारंभिक इकाई सेल प्रति एमएल है, तो सुनिश्चित करें कि गणना के अंत में इकाइयाँ समान रहती हैं। यदि प्रारंभिक एकाग्रता भाग प्रति मिलियन (बीपीडी) है, तो अंतिम एकाग्रता भी बीपीजे इकाइयों में होनी चाहिए।