जीवाणु वृद्धि को मापने के कई तरीके हैं, और एक तरीका दूसरे की तुलना में अधिक जटिल है। हालांकि कभी-कभी माप की निरंतरता को नजरअंदाज करना पड़ता है, बैक्टीरिया के विकास को सटीक रूप से मापने के लिए सबसे आसान तरीका पर्याप्त है, इसलिए इसे अक्सर उपयोग किया जाता है। सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली विधियाँ बैक्टीरिया की निगरानी और गिनती, सूखे या गीले द्रव्यमान को मापना और मैलापन / मैलापन के स्तर को मापना हैं। आपके विद्यालय की प्रयोगशाला में इनमें से कम से कम एक प्रयोग करने के लिए आवश्यक उपकरण और उपकरण होने चाहिए।
कदम
विधि 1 में से 3: मॉनिटरिंग बैक्टीरिया लाइव
चरण 1. सामग्री तैयार करें।
ऐसे कई विशेष उपकरण हैं जिन्हें तैयार करने की आवश्यकता है और हो सकता है कि जीव विज्ञान प्रयोगशाला में उपलब्ध न हों। प्रयोग चलाने से पहले सभी उपकरण और कंटेनर तैयार कर लें ताकि प्रक्रिया के दौरान कोई परेशानी न हो। आपको तुरंत उपयोग किए जाने वाले प्रत्येक घटक और इस प्रयोग की मूल शर्तों को जानना होगा।
- मतगणना कक्ष तैयार करें। इसमें एक अंतर्निर्मित कक्ष, माइक्रोस्कोप ग्लास और माइक्रोस्कोप है, इसलिए इसे स्थापित करना और उपयोग करना आसान है। आप इसे लैब या स्कूल सप्लाई स्टोर से खरीद सकते हैं। इस टूल में ऐसे निर्देश होने चाहिए जो पूरी प्रक्रिया में आपका मार्गदर्शन करें।
- एक डालने वाला कप या स्प्रेड कप तैयार करें। ये दोनों कंटेनर आपको अंदर के बैक्टीरिया की निगरानी करने की अनुमति देते हैं।
- संस्कृति एक प्रयोग में जीवों की वृद्धि का वर्णन करने के लिए प्रयोग किया जाने वाला शब्द है।
- शोरबा एक तरल माध्यम है जिसमें संस्कृति बढ़ती है।
चरण 2. डालना प्लेट या स्प्रेड प्लेट विधि का प्रयोग करें।
माइक्रोस्कोप का उपयोग करके देखने के लिए आप बैक्टीरिया को सीधे डिश पर भी रख सकते हैं। कल्चर को तश्तरी पर डालें और माइक्रोस्कोप के नीचे रखें। उपस्थित जीवाणु कोशिकाओं की संख्या की निगरानी करें।
चरण 3. सुनिश्चित करें कि एकाग्रता की खुराक सही है।
यदि बहुत अधिक हैं, तो बैक्टीरिया एक दूसरे पर ढेर हो जाएंगे और आप गलत अनुमान लगा सकते हैं। अधिक शोरबा में मिलाकर संस्कृति को पतला करें। यदि बहुत कम हैं, तो गणना के परिणाम सटीक नहीं होंगे। एक निस्पंदन सिस्टम का उपयोग करके शोरबा को तनाव दें।
चरण 4. बैक्टीरिया की गणना करें।
अंतिम चरण बैक्टीरिया को एक-एक करके गिनना है। गिनती कक्ष में आवर्धक लेंस के माध्यम से देखें और आपको दिखाई देने वाले जीवाणुओं की संख्या लिखें। अन्य परीक्षणों के परिणामों के साथ परिणामों की तुलना करें।
विधि 2 का 3: सूखा और गीला द्रव्यमान मापना
चरण 1. सुनिश्चित करें कि आपके पास सही उपकरण हैं।
यह विधि महंगे उपकरण और बहुत समय का उपयोग करती है। यदि आपकी प्रयोगशाला में आपके लिए आवश्यक उपकरण नहीं हैं, तो किसी अन्य विधि का उपयोग करना एक अच्छा विचार है। हालाँकि, यदि आपकी प्रयोगशाला पर्याप्त रूप से सुसज्जित है, तो हम इस पद्धति की अनुशंसा करते हैं क्योंकि यह अधिक सुसंगत परिणाम प्रदान करती है। इस विधि में, आपको आवश्यकता होगी:
- हाइड्रोलिक गुरुत्वाकर्षण संवहन ओवन
- एल्यूमीनियम से बना वजनी कंटेनर
- फ्लास्क का एक सेट (प्रयोगशाला की बोतलें)
- केन्द्रापसारक मशीन (अपकेंद्रित्र) या प्रयोगशाला निस्पंदन सिस्टम
चरण 2. सुनिश्चित करें कि संस्कृति कुप्पी में है।
कद्दू में संस्कृति जोड़ें। इस स्तर पर, संस्कृति शोरबा होना चाहिए, हालांकि बाद में इसे फिर से अलग कर दिया जाएगा।
चरण 3. एल्युमिनियम तोलने वाले कंटेनर को लैब ओवन में सुखाएं।
इसके बजाय, आप 47 मिमी के व्यास और 0.45μm के एक छिद्र आकार के साथ एक सेलूलोज़ एसीटेट फ़िल्टर झिल्ली का उपयोग कर सकते हैं। आप जिस भी तौल पात्र का उपयोग करें, उसका वजन करें क्योंकि जीवाणु कोशिकाओं को तोलते समय बाद में इसे काटना होगा।
चरण 4. कुप्पी में संस्कृति को तब तक हिलाएं जब तक कि यह समान रूप से मिश्रित न हो जाए।
गुरुत्वाकर्षण के कारण सेल स्वाभाविक रूप से डूब जाएगा और फ्लास्क में समान रूप से फैलाने के लिए इसे हिलाने की आवश्यकता होगी। इस तरह, आपके पास अधिक नमूने हो सकते हैं।
चरण 5. बैक्टीरियल कोशिकाओं को शोरबा से अलग करने के लिए एक केंद्रापसारक का प्रयोग करें ।
यह उपकरण फ्लास्क को घुमाता है और तेजी से संतुलित करता है ताकि यह शोरबा को बहा दे और संस्कृति को फ्लास्क में छोड़ दे।
चरण 6. कद्दू पर पेस्ट को खुरच कर एक तौलने वाले कंटेनर में रख दें।
शोरबा को फेंक दें क्योंकि अब आपको इसकी आवश्यकता नहीं है। हालांकि, अभी तक कद्दू से छुटकारा न पाएं क्योंकि यह अभी भी इस्तेमाल किया जाएगा।
चरण 7. केन्द्रापसारक मशीन को कुल्ला और कंटेनर में कुल्ला पानी डालें।
गीला वजन प्राप्त करने के लिए जीवाणु कोशिकाओं पर कुप्पी में कुल्ला पानी गिराएं।
चरण 8. शुष्क भार ज्ञात कीजिए।
सूखे वजन को मापने के लिए, कंटेनर को ओवन में रखें और उपयोग किए गए ओवन और/या तोलने वाले कंटेनर के निर्देशों के अनुसार १००ºC पर ६-२४ घंटों के लिए सुखाएं। सुनिश्चित करें कि तापमान बहुत अधिक न हो ताकि बैक्टीरिया जलें नहीं। समाप्त होने पर बैक्टीरिया का वजन करें, और वजन कम करने के लिए कंटेनर के वजन से परिणाम कम करना न भूलें।
विधि 3 में से 3: मैलापन मापना
चरण 1. आवश्यक उपकरण तैयार करें।
आपको एक प्रकाश स्रोत और एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर की आवश्यकता होगी। दोनों प्रयोगशाला आपूर्ति स्टोर पर प्राप्त किए जा सकते हैं। स्पेक्ट्रोफोटोमीटर में ऐसे निर्देश होने चाहिए जो आपके पास मौजूद मॉडल के अनुसार उपकरण का उपयोग करने में आपका मार्गदर्शन करेंगे। स्पेक्ट्रोफोटोमीटर की कीमत काफी सस्ती और उपयोग में आसान है ताकि यह बैक्टीरिया के विकास को मापने के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली विधियों में से एक बन सके।
चरण 2. नमूना हल्का करें।
लेमैन के शब्द के अनुसार, मैलापन एक नमूने की मैलापन का स्तर है। आपको मैलापन मापन संख्या प्राप्त करने की आवश्यकता है, जिसे एनटीयू (नेफेलोमेट्रिक टर्बिडिटी यूनिट) में मापा जाता है। नमूने को सटीक रूप से मापने से पहले इस उपकरण को कैलिब्रेट करने की आवश्यकता है।
चरण 3. परिणाम रिकॉर्ड करें।
नमूने में बैक्टीरिया की संख्या से मैलापन प्रभावित होता है। स्पेक्ट्रोफोटोमीटर आपको संचरण का प्रतिशत (%T) भी बताएगा। मैलापन कम होने पर यह आंकड़ा बढ़ जाएगा। बैक्टीरिया के विकास को मापने के लिए अन्य परीक्षणों के परिणामों के साथ परिणामों की तुलना करें।
चेतावनी
- चूंकि आप एक जीवाणु कॉलोनी से निपट रहे हैं, सुरक्षा उपकरण जैसे सुरक्षा चश्मा और दस्ताने पहनकर सावधानी बरतें। मास्क पहनना भी एक अच्छा विचार है, खासकर यदि आप नहीं जानते कि किस प्रकार के बैक्टीरिया का अध्ययन किया जा रहा है।
- किसी भी प्रकार के बैक्टीरिया को संभालने से पहले सावधानी बरतें, यहां तक कि हानिरहित प्रकार के भी। सुनिश्चित करें कि आपके शरीर पर सभी खुले घाव शुरू करने से पहले पूरी तरह से ढके हुए हैं।
